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土壤幾丁質酶(S-Chitinase)檢測試劑盒(分光光度法50T/24S)

貨號 SH0369 售價(元) 816
規(guī)格 50T/24S CAS號
  • 產(chǎn)品簡介
  • 相關產(chǎn)品

貨號

名稱

規(guī)格

SH0369

土壤幾丁質酶(S-Chitinase)檢測試劑盒(分光光度法50T/24S)

50管/24樣

正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定                                             

測定意義:

幾丁質主要存在于蝦、蟹、昆蟲等甲殼類動物的外殼與軟體動物的器官(例如烏賊的軟骨),以及真菌類的細胞壁中,而幾丁質酶(EC 3.2.1.14)可催化幾丁質水解,具有抵御真菌侵染的作用,成為抗真菌病害的研究熱點。

測定原理:

幾丁質酶水解幾丁質產(chǎn)生N-乙酰氨基葡萄糖,進一步與對二甲氨基苯甲醛產(chǎn)生紅色化合物,在585nm處有特征吸收峰,吸光值增加速率反映了幾丁質酶的活性。

試劑組成和配制:

產(chǎn)品名稱

SH0369-50T/24S

Storage

試劑一:液體

10ml

4℃

試劑二:液體

4ml

4℃

試劑三:液體

50ml

4℃避光

說明書

一份

自備儀器和用品:

天平、水浴鍋、離心機、震蕩儀、可見分光光度計、1 ml玻璃比色皿,甲苯、蒸餾水。

樣品處理:

新鮮土樣風干,過30-50目篩。

測定操作表:

 

對照管

測定管

土樣(g

0.2

0.2

甲苯(μl

30

30

混勻,25℃靜置15min

蒸餾水(μl

200

 

試劑一(μl

 

200

混勻,37℃培養(yǎng)24h

蒸餾水(μl

400

400

4000rpm,4℃,離心10min,取上清300μl于新的EP管中

試劑二(μl

30

30

混勻,沸水浴5min

試劑三(μl

900

900

混勻,37℃顯色20min,取1ml1ml玻璃比色皿中,蒸餾水調零,測定585nm處吸光值,記為A對照管和A測定管,ΔA=A測定管-A對照管。

計算公式

標準曲線:y=5.2714x-0.0007R2=0.9989;x為標準品濃度(mg/ml),y為吸光值ΔA

酶活性定義:37℃條件下,每克土壤每天分解幾丁質產(chǎn)生1μg N-乙酰氨基葡萄糖的酶量為一個酶活性單位。

土壤幾丁質酶活性(μg/d/g 土樣)=ΔA +0.0007÷5.2714×V反總÷W÷T×1000= 598×ΔA +0.0007

V反總:反應體系總體積,0.63mlW:樣本質量,0.2g;T:反應時間,1d;10001mg/ml=1000μg/ml

注意事項:

試劑一充分混勻后再使用。

 

 

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